[1]温机灵,周祥福,温机智,等.抑癌基因RUNX3在膀胱癌T24细胞株中的表达以及对凋亡的影响[J].中华腔镜泌尿外科杂志(电子版),2008,(04):51-55.
　WEN Ji-ling,ZHOU Xiang-fu,WEN Ji-zhi,et al.Expression of Runx3 gene and its relationship with apoptosis in Human Bladder Cancer T24 Cell Line[J].,2008,(04):51-55.
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抑癌基因RUNX3在膀胱癌T24细胞株中的表达以及对凋亡的影响()
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中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]

卷:
期数:
2008年04期
页码:
51-55
栏目:
出版日期:
1900-01-01

文章信息/Info

Title:
Expression of Runx3 gene and its relationship with apoptosis in Human Bladder Cancer T24 Cell Line
作者:
温机灵; 周祥福; 温机智; 周琦; 王林
上海市即墨路150号同济大学附属东方医院泌尿外科,上海,200120，广州市天河路600号中山大学附属第三医院泌尿外科,广州,510630，广州市天河路600号中山大学附属第三医院中心实验室,广州,510630
Author(s):
WEN Ji-ling; ZHOU Xiang-fu; WEN Ji-zhi; ZHOU Qi; WANG Lin
关键词:
膀胱肿瘤; 抑癌基因; T24细胞; 甲基化
摘要:
目的 明确RUNX3抑癌基因在正常膀胱组织和膀胱癌T24细胞株的甲基化状态,并将野生型RUNX3基因转染T24细胞,探讨RUNX3基因恢复表达后对膀胱癌细胞凋亡的影响. 方法应用RT-PCR、甲基化特异性PCR和非甲基化PCR检测正常膀胱组织、膀胱癌T24细胞中RUNX3基因的表达以及基因启动子区域CpG岛的甲基化状态.构建真核载体的RUNX3-EGFP-pDest质粒,在LipefectamineTM2000介导下转染膀胱癌T24细胞,转染实验设立3组:空白对照组、空质粒EGFP-pDest转染组以及RUNX3-EGFP-pDest转染组.Western blot检测RUNX3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡情况. 结果正常膀胱组织RT-PCR可检测出1248bp的RUNX3基因条带,而膀胱癌T24细胞中无法检测出RUNX3基因的表达.正常膀胱组织RUNX3基因甲基化PCR检测阴性,非甲基化PCR阳性;T24细胞反之.正常膀胱粘膜组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组Western blot检测,均表达RUNX3蛋白,而膀胱癌T24细胞未表达RUNX3蛋白.流式细胞仪检测,空白对照组的凋亡率为(3.1±0.46)%,而EGFP-pDest转染组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组的凋亡率分别为(10.1±1.62)%、(41.20±1.53)%,应用方差分析的LSD法和SNK法进行均数的多重两两比较,RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组与EGFP-pDest转染组、空白对照组凋亡率之间的差异均具有显著性,P<0.01.结论 正常膀胱组织RUNX3基因正常表达,未发生启动子区域CpG岛甲基化,而膀胱癌T24细胞可能因RUNX3基因启动子区域CpG岛发生甲基化,致RUNX3基因无法表达.转染野生型RUNX3抑癌基因后促进了膀胱癌T24细胞的凋亡.

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备注/Memo

备注/Memo:
广东省科技计划项目(2002C30303)；广州市科技局项目(2002Z3-E0017)
更新日期/Last Update: 1900-01-01